介紹徠卡熒光顯微鏡的燈泡調中和熒光觀察

    一、燈泡調中：

    （1）任選一塊標本放在載物臺上；

    （2）轉動鏡臂上的聚光鏡旋鈕使聚光鏡移出光路，轉動濾色片組轉換手輪，將紫光(V)或藍光(B)或綠光(G)激發濾色片組轉入光路，并將10X熒光物鏡轉入光路；

    （3）調節粗微調手輪，將標本像調焦清晰；

    （4）前后推動垂直照明器右邊的聚光鏡調焦推桿，使視場光欄成像清晰，轉動視場光欄撥桿將視場光欄收小，調節視場光欄調中螺釘使視場光欄居中，然后再將視場光欄開至較大；

    （5）轉動鏡臂上的聚光鏡旋鈕使聚光鏡移入光路，前后調節燈箱上的聚光鏡撥桿，使汞燈的弧光在視場內成像清晰；

    （6）調整燈箱上的燈泡水平調節螺釘和垂直調節螺釘，使汞燈的弧光居中；

    （7）調整反光鏡水平調節螺釘和垂直調節螺釘，使光源的反射像與汞燈的弧光分開；

    （8）轉動聚光鏡旋鈕把聚光鏡移出光路，此時視場照明均勻。

 

    二、熒光觀察：

    （1）將熒光染色標本放到載物臺上。

    （2）將10X平場物鏡或40X熒光物鏡轉入光路，調節載物臺縱橫移動手輪，將標本移入光路。

    （3）轉動濾光片轉換撥輪，將熒光染色標本所需要的激發濾光片組轉入光路。激發濾光片組編號刻在濾片組轉換撥輪上。濾光片選擇正確與否，是徠卡熒光顯微鏡能否得到正確應用的關鍵。選用濾光片時，必須遵守斯托克斯定律：激發濾光片的透射波長<雙色束分離器的透射波長<阻斷濾光片的透射波長。由于激發濾光片、雙色束分離器和阻斷濾光片，出廠時已按其用途和本身的光學特性進行了嚴格的組合匹配，在觀察和攝影時，只需選擇濾光片組即可。

    （4）調節粗調手輪，當看清熒光圖像輪廓后，再用微調手輪調焦，直至看到清晰的熒光圖像。

    （5）當需要得到較強的熒光圖像時，可轉動聚光鏡旋鈕把聚光鏡移入光路，可獲得較明亮的熒光圖像。

    （6）當需要使用40X或100X熒光物鏡觀察時，應在標本和物鏡間加上甘油，油中不能有影響觀察的小泡或雜質。使用時可使甘油慢慢浸潤一會兒，然后輕輕左右來回轉動物鏡轉換器以排除氣泡。

     徠卡熒光顯微鏡對于物質的檢出能力是非常高的，具有放大的作用；而且對于被檢測物質的細胞的刺激也是非常小的，可以檢測活體的染色體；還有就是可以進行多個步驟的染色。對于熒光素的構造觀察是非常好的，一般的顯微鏡是看不出來的。而且對于一些物質是否有熒光，熒光是什么色調的進行判斷，還能看出是不是抗體的熒光。此款顯微鏡對于物體的定性、定量分析都是可以測定的。