類器官厚樣本成像，徠卡共聚焦系統解決方案

自21世紀初，隨著干細胞研究和組織工程的重大突破，類器官及其在顯微成像中的應用取得了顯著進展。已開發的多種類器官模型，如大腦、肝臟和腸道類器官，為研究器官發育、疾病機制揭示及治療評估提供了新途徑。同時，類器官成像技術的發展極大地促進了研究人員對這些復雜三維結構以細節和動態模式進行觀察的能力。盡管如此，類器官研究仍面臨多個挑戰，包括維持樣本活性、確保成像深度與分辨率，及處理和分析大量數據的需求。

共聚焦顯微鏡物鏡的發展，特別是用于觀察厚樣本的物鏡，對匹配樣本和周圍介質的折射率至關重要，否則會影響成像深度。高數值孔徑的油浸物鏡雖然提供高分辨率，但當用于水樣本時由于折射率不匹配而面臨限制，導致球面像差。這影響了能夠有效成像的樣本深度，并降低了圖像質量。

為了解決這些挑戰，研究人員開始使用甘油作為一種折射率接近生物樣本的介質，將樣本置于甘油中，并使用甘油物鏡進行成像。隨著技術的進步，甘油物鏡的設計和性能不斷改進，成為現代顯微鏡中常見的物鏡類型之一。

如今，大多數固定樣本都使用基于甘油的Mowiol、Vectashield或類似混合物進行封片。這些介質的折射率接近80/20甘油/水混合物的折射率（ne=1.45）。甘油物鏡（介質折射率1.46）是在這種介質中封裝的樣本的更佳選擇。

由于折射率匹配，甘油物鏡減少了散射和光損失，在廣泛的波長范圍內都具有較好的透明度，提高了圖像質量和信號強度，因此可實現更深的成像深度